示差折光检测器和紫外检测器、蒸发光散射检测器一样,也是液相色谱仪常用的检测器之一。由于各种物质具有不同的折射率,溶剂和样品各组分折射率存在一定差异,所以通过检测折射率的变化,就可以达到分析样品组分的目的。
使用示差折光检测器要注意以下几点:
1.正确放置溶剂瓶和废液瓶
要把溶剂瓶和废液瓶放在比示差折光检测器和容剂泵还要高的位置,这样可以使样品池有一定压力,有利于优化检测器的性能。
2.循环使用流动相
建议循环使用流动相。在没有进行分析时,打开循环阀,让流动相进行循环,这样泵就可以连续运行不必停止,一直到进行下一个分析。这样操作不仅可以节省流动相,而且检测器可以连续稳定的运行,随时进行样品分析。
3.示差折光检测器不能用做梯度洗脱
由于介质的改变和压力的波动都会影响基线的稳定性,所以使用示差折光检测器时不能进行梯度洗脱。
4.保证检测器的温度恒定
光学系统和流动相的温度对基线的稳定性影响很大。示差折光检测器可在比室温高5℃到55℃的范围内控温。建议将温度设为比室温高5℃,并确保柱温箱的温度与检测器保持一致。温度不宜过高,因为介质的折光指数随温度升高而降低,温度过高会使灵敏度降低。
5.不可让流通池承受过大的压力
示差折光检测器流通池的反压约为5bar,如果还要在系统里廉洁其他检测器或馏分收集器,必须将它们连接在示差折光检测器之前。即示差折光检测器在流路系统里必须放在最后,以防压力增大时损坏流通池。
6.某些溶剂随长时间存放而改变会造成基线的漂移
例如乙腈/水的混合物中乙腈的含量会降低,四氢呋喃会变成过氧化物,在吸湿性有机溶剂中的水量会增加,而保存在参比流通池中的溶剂如四氢呋喃会产生气体。
7.避免流动相和特定的色谱柱反应
某些流动相和特定的色谱柱反应,会产生长时间的噪声,例如乙腈/水流动相和氨丙基键合固定相在一起会出现这一现象。要判断长时间的噪声是否是由流动相/色谱柱的反应而产生,应该使用限流毛细管代替色谱柱,考查示差折光检测器的性能。